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OptiPrep™ Density Gradient Medium 密度梯度離心液

產品編號1893
產品規格250ml

OptiPrep™ 是一種無菌且經過內毒素檢測的溶液，可以用於分離多種生物樣品、細胞及亞細胞 (subcellular) 組成等等，如各種胞器、外泌體、巨分子蛋白、核酸、病毒等等，為一款多功能、多用途的密度梯度分離液。

OptiPrep 和 Percoll 都是細胞分離用的密度梯度離心介質，但 OptiPrep 使用無毒的 iohexol 成分，對細胞無害且不易被細菌分解，而 Percoll 使用 polyvinylpyrrolidone (PVP) 包覆的矽膠微粒，可能會對某些細胞造成影響。因此，需要細胞存活率高且希望避免外來物質干擾時，可考慮 OptiPrep。

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商品詳細介紹Product Introduction

OptiPrep™ 是一種非離子型的碘化物，其主要成分是 60% 碘克沙醇 (Iodixanol)，密度為 1.32 g/ml，最初是為了 X 光顯影劑而開發，因此經過了嚴格的臨床測試。因 OptiPrep™ 具高密度，因此可藉由連續或不連續型式的梯度離心或使用密度梯度屏障 (density barrier) 配置成不同密度來分離不同樣品。

OptiPrep™ 產品特色：

非離子型、對細胞無毒、具代謝惰性
不含多糖，黏度和滲透壓均較低
在所有可用密度下皆可達到等滲透狀態

OptiPrep™ 成份及規格：

Iodixanol：60% (w/v)
密度：1.320 ± 0.001 g/ml
內毒素：<1.0 IU/ml *實測 <0.13 EU/ml，遠低於歐洲標準 (1 EU/ml)*

注意：OptiPrep™ 暴露在陽光直射下 (數月) 會導致碘緩慢釋放，溶液因此變黃，因此OptiPrep™ 應避免陽光直射。此外，於靜置儲存時，碘克沙醇 (iodixanol) 可能會從OptiPrep™ 濃縮之原液中 “沉澱”，因此使用前應充分混合。

訂購資訊

貨號	品名	包裝
1893	OptiPrep™ Density Gradient Medium	250ml

配制不同密度的 OptiPrep™：
配製方法是基於使用 0.85% (w/v) NaCl, 10 mM Tricine-NaOH, pH 7.4 作為懸浮細胞液。為了使溶液在任何梯度下都保持濃度恆定，首先將 4 份體積的 OptiPrep™ 與 2 份體積的 溶液A ( 3 倍濃度的緩衝液) 混合，用以製備 40% (w/v) 的工作溶液 (Working solution)。最後，使用溶液 B 進一步稀釋工作溶液，以獲得適當密度的梯度溶液，常見的密度配製見表1。

製備 100mM stock solution：使用 100ml ddH2O 溶解 Tricine (1.79g) 或 HEPES (2.38g)。
溶液 A：取 0.85g 的 NaCl 溶於 50ml 水中，加入 30ml Tricine 或 HEPES stock solution，再使用 1M NaOH 調整至 pH7.4，補體積至 100ml。
溶液 B：取 0.85g 的 NaCl 溶於 50ml 水中，加入 10ml Tricine 或 HEPES stock solution，再使用 1M NaOH 調整至 pH7.4，補體積至 100ml。
工作溶液 (working solution, WS)：取4 份體積的 OptiPrep™ 與 2 份體積的溶液A ( 3 倍濃度的緩衝液) 混合。

溶液 B 中其他添加物 (例如 Mg2+ 或 Ca2+) 濃度較低 (1-2 mM)，可在 溶液 A 中加入 3-6 mM (濃度) 來保持梯度溶液的恆定，但其密度和折射率與表1 中的數值相比會略有不同。所有的梯度溶液的滲透壓均在 285-305 mOsm 範圍內。
若認為無需維持恆定的緩衝液 (及/或二價陽離子) 的濃度，亦則可直接用 溶液 B (含或不含低濃度二價陽離子) 稀釋 OptiPrep™，其梯度溶液的密度和滲透壓只會略有不同 (與表 1 中的數值相比)。

工作溶液和梯度溶液也可直接用細胞緩衝液 (例如 Hanks Balanced Salt Solution, HBSS) 或無血清培養基 (例如 RPMI 或 DMEM) 直接稀釋 OptiPrep™ 來製備，這些的密度與溶液 B (約 1.006 g/ml) 相同。梯度溶液的密度可能略高於表1 中所列的數值 (約高 0.001 g/ml)，折射率也可能略高 (高 0.0001-0.0004)。所有溶液的滲透壓莫爾濃度 (OSM) 範圍均為 285-305 mOsm。

含 10% (v/v) 血清的標準細胞培養基也可直接用於稀釋 OptiPrep™，由於稀釋液的密度 (約1.009 g/ml) 高於任何平衡鹽培養基 (HBSS)，因此梯度溶液的密度也會相對較高。表2 比較了由含血清和不含血清的 RPMI 培養基製備的所選梯度溶液的密度。

表格1 (常見密度配置表)

密度 (Density)	碘克沙醇 (Iodixanol) %	工作溶液 (WS) + 溶液 B	折射率 (refractive index, RI)
1.037	6.0	0.6 + 3.4	1.3444
1.048	8.0	0.8 + 3.2	1.3475
1.058	10.0	1.0 + 3.0	1.3507
1.069	12.0	1.2 + 2.8	1.3538
1.079	14.0	1.4 + 2.6	1.3569
1.090	16.0	1.6 + 2.4	1.3601
1.100	18.0	1.8 + 2.2	1.3632
1.111	20.0	2.0 + 2.0	1.3663
1.121	22.0	2.2 + 1.8	1.3694
1.132	24.0	2.4 + 1.6	1.3726
1.142	26.0	2.6 + 1.4	1.3757
1.153	28.0	2.8 + 1.2	1.3788
1.163	30.0	3.0 + 1.0	1.3820
1.174	32.0	3.2 + 0.8	1.3851
1.184	34.0	3.4 + 0.6	1.3882
1.195	36.0	3.6 + 0.4	1.3914
1.205	38.0	3.8 + 0.2	1.3945
1.215	40.0		1.3976

表2 (以無血清及含 10% 血清之 RPMI 稀釋 OptiPrep™ 製備密度溶液之差異)

碘克沙醇 (Iodixanol) %	密度 (g/ml)
碘克沙醇 (Iodixanol) %	無血清	含10%血清
10	1.058	1.061
15	1.084	1.087
20	1.110	1.113
25	1.137	1.139
30	1.163	1.165
35	1.189	1.191
40	1.215	1.216

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